QA手记之培养基配制过程

1.配制溶液
　　 向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。对蛋白胨、牛肉膏（闻着味道相当不错的东西）等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。
　　 配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。不过现在都购买商品培养基干粉了，按照说明书上的比例溶解煮沸就万事OK了，不过感觉疾控中心的人挺业余的，对产品的特点相当不了解。2.调节pH值
　　 用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。根据老法师的介绍，细菌、真菌在偏酸性的环境中生长得很好。
3.过滤
　　 用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。（商品培养基此步省略）4.分装
　　 已过滤的培养基应进行分装。如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。
　　 分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
　　 装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高
度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。这步并不是我原来想像的用加样枪来加样，而是用移液管来操作：一手拿试管，一手拿移液管，可移液管上方用来控制取液量的洗耳球怎么办？我可没有第三只手了！看了教学片才明白，原来这一步操作相当恶心－－要用嘴巴吸的！受不了……5.加棉塞
　　 分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸
水使棉塞无法使用。制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同
时左手食指与姆指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。棉塞
不要过紧过松，塞好后，以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。棉塞的2/3应在管内或瓶内，上端露出少许棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳
捆札，准备灭菌。这一步也是费了半天劲，第一次做棉花塞，要么大了塞不进去，要么就是小了掉进去拉不出来。好不容易弄好了20管棉塞，辛苦ing……6.制作斜面培养基和平板培养基 培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，须趁培养基未凝固时进行。在实验台上放1支长0.5～1米左右的木条，厚度为1厘米左右。将试管头部枕在木条上，使管内培养基自然倾斜，凝固后即成斜面培养基。 第一次进行培养基配制，弄得手忙脚乱，不过好在工作台并没有像我的思维那么杂乱，培养基配制完成以后，所有的记录必须如实填写，接下来就是整整14天的观察培养了，我的宝贵时间！！